鉬釩酸顯色液有兩類(lèi)：根據(jù)被檢物的化學(xué)組成是否遭受破壞，分為破壞性顯色液和非破壞性顯色液。
 

　　在實(shí)驗(yàn)中我們一般將它調(diào)配成A，B兩種液體，當(dāng)需要顯色時(shí)就分別加入A，B液，當(dāng)混合液與實(shí)驗(yàn)中復(fù)合物(抗原抗體復(fù)合物)反應(yīng)就會(huì)產(chǎn)生顯色效果。
 

　　A液一般由：PBS緩沖液，檸檬酸，ED-TA乙二氨四乙酸，ProcLin-300，*(*揮發(fā)性太高，容易丟失，我們現(xiàn)在正用過(guò)氧化脲來(lái)代替，效果還不錯(cuò))組成。
 

　　B液一般由：PBS緩沖液，檸檬酸，ED-TA乙二氨四乙酸，ProcLin-300，硫代*等。
 

　　由于鉬釩酸顯色液的反應(yīng)一旦開(kāi)始就一直持續(xù)反應(yīng)，所以，當(dāng)達(dá)到理想效果時(shí)一定要終止反映，就需要加入終止液了。
 

　　鉬釩酸顯色液的配置方法：
 

　　試劑：
 

　　1)鹽酸(1+1水溶液)硝酸高氯酸
 

　　2)釩鉬酸銨顯色劑：稱(chēng)取偏釩酸銨1.25g，加硝酸250ml，另稱(chēng)取鉬酸銨25g，加水400ml加熱溶解，在冷卻的條件下，將兩種溶液混合，用水定容成1000ml。避光保存，若生成沉淀，則不能繼續(xù)使用。
 

　　3)磷標(biāo)準(zhǔn)液：將磷酸二氫鉀在105oC干燥1h，在干燥器中冷卻后稱(chēng)取0.2195g溶解于水，定量轉(zhuǎn)入1000ml容量瓶中，加入硝酸3ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即為50mg/ml的磷標(biāo)準(zhǔn)液。
 

　　試樣的分解
 

　　干法：與Ca測(cè)定試樣的制備方法一致，在實(shí)際中，Ca，P使用同一分解液。
 

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備：
 

　　準(zhǔn)確移取磷酸標(biāo)準(zhǔn)液，取0、1.0、2.0、5.0、10.0、15.0ml于50ml容量瓶中，各加釩鉬酸銨顯色劑10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，常溫下放置10min以上，以0ml溶液為參比，用10mm比色池，在420nm波長(zhǎng)下，用分光光度計(jì)測(cè)定各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
 

　　試樣的測(cè)定：
 

　　準(zhǔn)確移取試樣分解液0.5ml—10ml(含磷量50—750mg)(實(shí)際中取0.5ml)于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸胺顯色劑10ml，按5的方法顯色和比色測(cè)定，測(cè)得試樣分解液的吸光度，用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查得試樣分解液的含磷量。一般先要將植物樣品的消化，再蒸餾、吸收和滴定。
 

　　測(cè)定N的話(huà)一般用凱氏法測(cè)定，測(cè)P一般用鉬藍(lán)比色法在分光光度計(jì)(72型)讀出消光值，對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得出。